■ 基本信息
別名: | pETGST |
啟動(dòng)子: | T7 |
復(fù)制子: | pBR322 |
終止子: | T7 terminator |
質(zhì)粒分類: | 大腸桿菌載體；PET系列表達(dá)質(zhì)粒 |
質(zhì)粒大小: | 3.7kb |
質(zhì)粒標(biāo)簽: | N-GST,C-6×His，N-P3C |
原核抗性: | Amp |
克隆菌株: | DH5α |
培養(yǎng)條件: | 37℃ |
表達(dá)宿主: | BL21(DE3) |
誘導(dǎo)方式: | IPTG或乳糖及其類似物 |
5'測(cè)序引物: | T7:TAATACGACTCACTATAGGG |
3'測(cè)序引物: | T7-ter:TGCTAGTTATTGCTCAGCGG |
■ 質(zhì)粒屬性
質(zhì)粒宿主: | 大腸桿菌 |
質(zhì)粒用途: | 蛋白表達(dá) |
片段類型: | 基因CDS
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片段物種: | 空載體
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原核抗性: | Amp |
真核抗性: |
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熒光標(biāo)記: |
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■ 質(zhì)粒簡(jiǎn)介
pET—GST表達(dá)載體采用T7啟動(dòng)子和GST融合表達(dá)，同時(shí)選用人鼻病毒14亞型3C蛋白酶專一性切割位點(diǎn)。此外，C端還添加了6個(gè)His，便于采用chelating sepharose親和層析。本載體表達(dá)的融合蛋白可采用吸附GST的親和層析和6個(gè)His的chelating sepharose雙重親和層析，極大地方便了下游純化。GST融合表達(dá)背景文獻(xiàn)在medline里極為豐富，有數(shù)百個(gè)基因采用GST融合表達(dá)成功。
■ 質(zhì)粒圖譜
■ 質(zhì)粒序列
部分序列，僅供參考：
1 tccccgcgcg ttggccgatt cattaatgca ggatctcgat cccgcgaaat taatacgact
61 cactataggg agaccacaac ggtttccctc tagatcacac aggaaacagt attcatgtcc
121 cctatactag gttattggaa aattaagggc cttgtgcaac ccactcgact tcttttggaa
181 tatcttgaag aaaaatatga agagcatttg tatgagcgcg atgaaggtga taaatggcga
241 aacaaaaagt ttgaattggg tttggagttt cccaatcttc cttattatat tgatggtgat
301 gttaaattaa cacagtctat ggccatcata cgttatatag ctgacaagca caacatgttg
361 ggtggttgtc caaaagagcg tgcagagatt tcaatgcttg aaggagcggt tttggatatt
421 agatacggtg tttcgagaat tgcatatagt aaagactttg aaactctcaa agttgatttt
481 cttagcaagc tacctgaaat gctgaaaatg ttcgaagatc gtttatgtca taaaacatat
541 ttaaatggtg atcatgtaac ccatcctgac ttcatgttgt atgacgctct tgatgttgtt
601 ttatacatgg acccaatgtg cctggatgcg ttcccaaaat tagtttgttt taaaaaacgt
661 attgaagcta tcccacaaat tgataagtac ttgaaatcca gcaagtatat agcatggcct
721 ttgcagggct ggcaagccac gtttggtggt ggcgaccatc ctccaaaatc ggacagcatg
781 ccagactctc tcgaagttct gtttcagggt ccagcaggat ccgcagaatt cagcgctagc
841 caccatcatc atcatcatta agcttgatcc ggctgct
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