■ 基本信息
啟動子: | CMV |
復(fù)制子: | pUC |
終止子: | WPRE，3’LTR |
質(zhì)粒分類: | 病毒系列，慢病毒克隆載體 |
質(zhì)粒大小: | 8204bp |
原核抗性: | Amp |
克隆菌株: | Stbl3 |
培養(yǎng)條件: | 37度 |
表達(dá)宿主: | 哺乳細(xì)胞 |
誘導(dǎo)方式: | 無須誘導(dǎo)，瞬時表達(dá) |
5'測序引物: | CMV-F：CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG |
3'測序引物: | 根據(jù)序列設(shè)計引物 |
■ 質(zhì)粒屬性
質(zhì)粒宿主: | 哺乳細(xì)胞,慢病毒 |
質(zhì)粒用途: | 蛋白表達(dá) |
片段類型: | ORF |
片段物種: | 空載體 |
原核抗性: | Amp |
真核抗性: |
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熒光標(biāo)記: | 綠色
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■ 質(zhì)粒簡介
plvx-ires-zsgreen1是HIV-1，慢病毒表達(dá)載體，讓你在幾乎任何哺乳動物細(xì)胞類型的興趣和zsgreen1蛋白同時表達(dá)，包括原代細(xì)胞。zsgreen1是人類密碼子優(yōu)化的變種的珊瑚礁Zoanthus屬綠色熒光蛋白，ZsGreen。向量表示的兩種蛋白雙順反子mRNA的轉(zhuǎn)錄，使zsgreen1作為轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的一個指標(biāo)，用流式細(xì)胞儀選擇標(biāo)記。
雙順反子的轉(zhuǎn)錄表達(dá)的組成性激活人類巨細(xì)胞病毒立即早期啟動子驅(qū)動（CMV）位于上游的MCS。腦心肌炎病毒（EMCV）內(nèi)部核糖體進(jìn)入位點(diǎn)（IRES），位于MCS和zsgreen1之間，有利于在IRES / zsgreen1結(jié)內(nèi)部起始位點(diǎn)zsgreen1帽獨(dú)立的翻譯。
plvx-ires-zsgreen1包含所有用于生產(chǎn)的必要的復(fù)制能力的慢病毒病毒處理的元素，以及元素來提高病毒滴度，外源基因的表達(dá)水平，和整體的向量函數(shù)。土撥鼠肝炎病毒轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)元件（WPRE）促進(jìn)RNA處理事件和增強(qiáng)病毒RNA核出口，導(dǎo)致增加病毒滴度包裝細(xì)胞。此外，載體包括Rev應(yīng)答元件（RRE），從而進(jìn)一步增加病毒滴度提高拼接的病毒RNA轉(zhuǎn)運(yùn)出細(xì)胞核。最后，plvx-ires-zsgreen1還包含一個中央聚嘌呤道/中央終止序列（CPPT / CTS）。在靶細(xì)胞感染過程中，該元素創(chuàng)建一個中央的DNA瓣，增加了病毒基因組的核導(dǎo)入，從而在改進(jìn)的矢量集成和更有效的轉(zhuǎn)導(dǎo)。載體還包含一個復(fù)制市局起源和大腸桿菌氨芐青霉素抗性基因（Ampr）在細(xì)菌繁殖和選擇。
■ 質(zhì)粒圖譜
■ 質(zhì)粒序列
質(zhì)粒序列請下載：
ZK758pLVX-IRES-ZsGreen1慢病毒表達(dá)質(zhì)粒.txt
