■ 產(chǎn)品介紹
Y1HGold菌株是Clontech公司開發(fā)的GAL4-AbA酵母單雜系統(tǒng)用菌株，MATα型，可直接轉(zhuǎn)化質(zhì)粒進(jìn)行篩庫試驗(yàn)。Transformation marker為: ura3，leu2；報(bào)告基因?yàn)椋篈bAr。Y1HGold-GAL4-AbA酵母單雜系統(tǒng)需要兩種質(zhì)粒配套使用：pAbAi和PGADT7。質(zhì)粒pAbAi的篩選標(biāo)志為URA，用于表達(dá)pBait-AbAi construct (1~3個(gè)bait DNA序列重復(fù)串聯(lián)后克隆到pAbAi中)；質(zhì)粒PGADT7的篩選標(biāo)志為LEU，用于表達(dá)AD(GAL4 C端768~881位氨基酸)與目標(biāo)蛋白（Prey）的融合蛋白。GAL4-AbA酵母單雜系統(tǒng)原理：Aureobasidin A(AbA)是一種環(huán)酯肽抗生素，在低濃度(0.1-0.2μg/ml)下即可對(duì)酵母產(chǎn)生毒性?；蚪M中整合了pBait-AbAi的酵母菌株（Bait-Reporter Yeast Strains），當(dāng)獵物蛋白（Prey）結(jié)合到誘餌序列（Bait DNA）上，GAL4 AD就會(huì)激活A(yù)bAr的表達(dá)，從而能夠在含有抗生素AbA的培養(yǎng)基上生長。AbAr與營養(yǎng)缺陷報(bào)告基因相比具有更低背景的優(yōu)點(diǎn)，可以降低酵母單雜假陽性發(fā)生的概率。在28℃有氧的條件下，Y1HGold菌株在無抗性的YPDA上生長，使用30%的甘油可保藏菌種。 |
基因型： | MATα, ura3-52, his3-200, ade2-101, trp1-901, leu2-3, 112, gal4Δ, gal80Δ, met–, MEL1 |
■ 基本信息
培養(yǎng)基: | YPD/YPDA |
菌株類別: | 酵母菌 |
培養(yǎng)條件: | 28℃，有氧，YPD/YPDA |
質(zhì)粒轉(zhuǎn)化: | 化轉(zhuǎn)/電轉(zhuǎn) |
保存方式: | 30%甘油，-80℃ |
基本應(yīng)用: | 酵母單雜交 |
■ 使用方法
收到菌液及時(shí)四區(qū)劃線活化，挑取單克隆在YPD中培養(yǎng)到生長對(duì)數(shù)中后期加入終濃度30%無菌甘油保種，分裝置于-80℃保存，避免反復(fù)化凍。建議超凈臺(tái)內(nèi)劃線涂板，避免雜菌污染。
■ 注意事項(xiàng)
1. 酵母菌在YPD培養(yǎng)基上會(huì)變粉，是正?，F(xiàn)象，可以由此特性鑒別是否為酵母菌。
2. 酵母菌種化凍1-2次活性下降，不建議直接長期保存。
3. 活化保種的種管建議分裝保存，反復(fù)凍融菌株活力下降。
4. 本產(chǎn)品僅可用于實(shí)驗(yàn)室研究，不能用于動(dòng)物，人體以及作為食品添加劑等用途。
5. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿 實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
