■ 產品介紹
GS115是畢赤酵母菌株，屬于真核細胞。一般的針對原核生物的抗生素例如卡那和氨芐對酵母是無效的，因此為了防止大腸桿菌等原核生物對酵母培養(yǎng)菌株污染，往往會在培養(yǎng)基中加入一些氨芐和卡那霉素的抗生素，來抑制細菌菌的污染和生長。GS115畢赤酵母自身表型為Mut+，但是GS115轉化株既能夠產生出Mut+菌株，也能夠產生出Muts菌株。目的蛋白在這兩種轉化株的表達水平可能是不同的，并且具有不可預測性，所以只有通過實驗才能得到最好的酵母表達方案。 畢赤酵母適宜的生長溫度是28至30度，溫度超過32度對蛋白的表達是有害的，并可能導致細胞的死亡。GS115畢赤酵母是是組氨酸缺陷型（His4基因型），如果表達載體上攜帶有組氨酸基因，可補償宿主菌的組氨酸缺陷，因此可以在不含組氨酸的培養(yǎng)基上篩選轉化子。這些受體菌自發(fā)突變?yōu)榻M氨酸野生型的概率一般低于10-8。GS115畢赤酵母可以在YPD培養(yǎng)基中生長，或者在補充有組氨酸的minimal media中生長，但是無法在單獨的minimal media培養(yǎng)基中生長。 巴斯德畢赤酵母，是甲醇營養(yǎng)型酵母中的一類能夠利用甲醇作為唯一碳源和能源的酵母菌。與其它酵母一樣，在無性生長期主要以單倍體形式存在，當環(huán)境營養(yǎng)限制時，常誘導2個生理類型不同的接合型單倍體細胞交配，融合成雙倍體。巴斯德畢赤酵母的另一個生物學特點是，甲醇代謝所需的醇氧化酶被分選到過氧化物酶體中，形成區(qū)域化。以葡萄糖作碳源時，菌體中只有1個或很少幾個小的過氧化物酶體，而以甲醇作碳源時，過氧化物酶體幾乎占到整個細胞體積的80%，AOX增至細胞總蛋白的35%-40%。因此，當在AOX基因前利用同源重組方式插入外源蛋白基因時，可獲得大量表達。同時，根據(jù)甲醇酵母這種可以形成過氧化物酶體的特性，既可利用該系統(tǒng)表達一些毒性蛋白和易被降解的酶類，也可用以研究細胞特異區(qū)域化的生物發(fā)生及其機制和功能，為高等動物類似的研究提供啟示。 |
基因型： | His4（基因型），Mut+（表型） |
■ 基本信息
培養(yǎng)基: | YPD/YPDA |
菌株類別: | 酵母菌 |
培養(yǎng)條件: | 28℃，有氧，YPD/YPDA |
質粒轉化: | 化轉/電轉 |
保存方式: | 收到后保種，30%甘油，-80℃ |
基本應用: | 用于蛋白表達 |
■ 使用方法
收到菌液及時四區(qū)劃線活化，挑取單克隆在YPD中培養(yǎng)到生長對數(shù)中后期加入終濃度30%無菌甘油保種，分裝置于-80℃保存，避免反復化凍。建議超凈臺內劃線涂板，避免雜菌污染。
■ 注意事項
1. 酵母菌在YPD培養(yǎng)基上會變粉，是正?，F(xiàn)象，可以由此特性鑒別是否為酵母菌。
2. 酵母菌種化凍1-2次活性下降，不建議直接長期保存。
3. 活化保種的種管建議分裝保存，反復凍融菌株活力下降。
4. 本產品僅可用于實驗室研究，不能用于動物，人體以及作為食品添加劑等用途。
5. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
