■ 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
零背景ZT4-Blunt克隆試劑盒是專門(mén)對(duì)平滑末端DNA片段或PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行高效克隆的一種陽(yáng)性篩選系統(tǒng)。該克隆載體包含一個(gè)致死基因，當(dāng)目的DNA片段插入克隆位點(diǎn)時(shí),該致死基因被破壞，故僅帶插入目的片段的克隆才能生長(zhǎng)形成白色菌落，無(wú)需加入IPTG及X-Gal進(jìn)行藍(lán)白斑篩選；克隆陽(yáng)性率超過(guò)95%。
■ 產(chǎn)品亮點(diǎn)
·可5min快速連接，且克隆效率超過(guò)95%
·無(wú)需IPTG及X-Gal進(jìn)行藍(lán)白斑篩選
·PCR擴(kuò)增產(chǎn)物無(wú)需磷酸化
·酶切產(chǎn)物無(wú)需去磷酸化
·專用于平滑末端DNA片段或PCR擴(kuò)增產(chǎn)物
·特別適合Pfu、KOD等系列產(chǎn)物的克隆
1.制備片段
| ★平端片段（Pfu、KOD等擴(kuò)增產(chǎn)物） |
| ★片段濃度最低可至5ng/μL |
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2.與載體混合加入連接酶
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★實(shí)現(xiàn)5min快連
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★最長(zhǎng)可連接10kb片段（即使5kb片段，也已超過(guò)95%的陽(yáng)性率）
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| ★載體穩(wěn)定性極高，反復(fù)凍融影響極低 |
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3.轉(zhuǎn)化
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★采用先進(jìn)的自殺基因篩選技術(shù)無(wú)需繁瑣藍(lán)白斑篩選，陽(yáng)性克隆率接近100%
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■ 菌落PCR
■ 儲(chǔ)存
-20℃下至少保存1年。
■ ZT4-Blunt載體測(cè)序引物序列
Forward Sequencing Primer，20-mer：5’-TAATACGACTCACTATAGGG-3’
Reverse Sequencing Primer，24-mer：5’-AAGAACATCGATTTTCCATGGCAG-3’
■ ZT4-Blunt載體圖譜
■ ZT4-Blunt載體多克隆位點(diǎn)序列
